靶向基因組編輯

CRISPR-Cas9 圖示生成器

使用 CRISPR-Cas9 圖示生成器,創建清晰的基因編輯機製圖。可呈現目標 DNA 解鏈、單導 RNA(sgRNA)間隔序列雜交、Cas9 核酸內切酶結構域切割,以及雙鏈斷裂後的修復路徑。

sgRNA 間隔序列與骨架PAM 5'-NGG 識別可編輯 SVG 與 PPTX適用於期刊排版

CRISPR-Cas9 圖示生成器

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三步生成 CRISPR-Cas9 圖示

繪制基因工程圖示,準確標注核酸酶結構域、靶序列雜交及後續 DNA 修復路徑,並在使用前核對科學內容。

指定引導 RNA、PAM 和靶位點

說明 Cas 酶變體(SpCas9、SaCas9、Cas12a)、20 nt 間隔序列、PAM 基序(5'-NGG)及目標基因組位點。

檢查核酸酶切割和修復機制

核對 HNH 和 RuvC 切割箭頭、R-loop 結構,以及 NHEJ 敲除或 HDR 定點插入等修復分支。

匯出可編輯向量圖用於發表

下載分層 SVG 圖形或原生 PowerPoint(PPTX)幻燈片,以調整核苷酸字型、蛋白配色和面板佈局。

CRISPR-Cas9 圖示示例

查看可編輯科學圖示,涵蓋 Cas9 核糖核蛋白結構、PAM 識別、核酸酶切割和精准鹼基編輯。

Cas9 RNP 復合物與結構域組成

展示雙葉結構的 Cas9 核酸內切酶,包括 REC 識別葉、NUC 催化葉、橋螺旋和 sgRNA 骨架的相互作用。

Cas9 RNP

PAM 識別與 R-loop 形成

展示原間隔序列鄰近基序(5'-NGG)結合後局部 DNA 解鏈,以及 20 nt 引導間隔序列與靶序列雜交。

5'-NGG-3' PAM

HNH 與 RuvC 核酸內切酶切割

展示 HNH 與 RuvC 在 PAM 上游 3 bp 處協同切割目標鏈和非目標鏈,形成平端雙鏈斷裂。

HNH

NHEJ 敲除與 HDR 定點插入修復

對比易出錯的 NHEJ 所產生的插入缺失,與 HDR 以模板為指導實現的高保真定點插入。

NHEJ

鹼基編輯與先導編輯系統

展示工程化切口酶融合蛋白,包括胞嘧啶/腺嘌呤鹼基編輯器(CBE/ABE)和逆轉錄酶先導編輯器(PE2/PE3)。

Base Editor

體內遞送與驗證讀出

對比 AAV 載體和脂質納米顆粒等遞送方式,以及 NGS 和 GUIDE-seq 脫靶驗證方法。

AAV
為何選擇 SciDraw

研究人員為何選擇 SciDraw 繪制 CRISPR 圖示

SciDraw 可用於起草科學圖示。使用前請依據來源資料核對標籤、關係與主張。

工作需求
SciDraw AI
通用影像生成工具
呈現雙葉蛋白結構
可呈現 REC 識別葉、NUC 催化葉和橋螺旋;請依據已發表的結構資料核對圖示。
無法區分 Cas9 的 REC/NUC 結構域與 sgRNA 髮夾骨架,常渲染為無結構色塊。
標注 PAM 與切割位置
圖示可保留 DNA 鏈 5' 到 3' 的方向,並標注 PAM 上游 3 bp 的切割位置;使用前請對照目標系統核對。
切割位點隨意放置,缺乏 5'-NGG-3' PAM 對齊與 R-loop 雙鏈解旋細節。
匯出向量圖和 PowerPoint 幻燈片
下載 SVG 或可編輯 PPTX 幻燈片,以調整核苷酸字符、顏色和線條粗細。
輸出靜態像素圖,無法修改鹼基序列或結構域標籤。
按許可和期刊規則使用圖示
付費方案允許依據 SciDraw 許可進行商業使用,但仍受適用法律、第三方權利和期刊披露要求限制。
授權範圍不透明,不便用於論文投稿與基金申請合規核查。
實用指南

CRISPR-Cas9 機製圖繪制實用指南

遵循科學可視化原則,提升圖示的準確性和可讀性,並對照目標期刊的最新投稿要求進行檢查。

Cas9 核糖核蛋白復合物圖,標注 REC 和 NUC 結構域及 sgRNA

1. Cas9 核酸內切酶與引導 RNA 的結構

CRISPR-Cas9(來源於化膿性鏈球菌的 II 型 CRISPR 系統)依靠核糖核蛋白(RNP)裝置協同工作。為發表而繪制系統結構時,應準確呈現各個組成部分:

  • 雙葉結構:Cas9 多肽折疊為兩個主要結構葉,中間由帶正電的橋螺旋連接:α 螺旋豐富的識別葉(REC)和核酸酶葉(NUC)。
  • NUC 催化結構域:NUC 葉包含兩個不同的核酸內切酶中心:HNH 切割互補的目標 DNA 鏈,RuvC 切割被置換的非互補鏈。
  • 單導 RNA(sgRNA)結構:工程化 sgRNA 由 20 nt 的靶向間隔序列和長度超過 80 nt 的反式活化 crRNA(tracrRNA)骨架組成,後者形成三個莖環結構。
  • PAM 識別:C 端 PAM 互作結構域(PID)與非目標鏈上的 5'-NGG-3' 原間隔序列鄰近基序結合,啓動局部雙鏈解旋。
NHEJ 與 HDR 修復路徑圖,對比 indel 敲除和模板指導的定點插入

2. DNA 雙鏈斷裂修復:NHEJ 與 HDR

完整的 CRISPR 機製圖通常需要呈現 Cas9 造成雙鏈斷裂(DSB)後,目標基因組位點在細胞中的後續命運:

  • 非同源末端連接(NHEJ):常見於不分裂細胞和哺乳動物體細胞。Ku70/Ku80 與 DNA-PKcs 募集到斷端並直接連接,過程中常產生小片段插入或缺失(indel),可能導致閱讀框移位並造成基因敲除。
  • 同源定向修復(HDR):主要在細胞週期 S 期和 G2 期活躍。Rad51 介導鏈侵入,並利用外源供體模板(ssODN 或雙鏈質粒)實現精確序列替換或標籤插入。
  • 替代技術:應區分標準雙鏈斷裂切割與切口酶介導的鹼基編輯(CBE/ABE 脫氨反應)和先導編輯(pegRNA 指導的逆轉錄酶合成);後兩者可繞過有意造成的雙鏈斷裂,以減少 indel。
PAM 識別和 DNA 解鏈圖,展示 5'-NGG 位點與 R-loop 形成

3. 同行評審稿件中 CRISPR 圖示的報告規範

學術期刊要求準確標注目標基因組序列、脫靶對照和圖示製作軟體的使用情況:

  • 序列標注:在 DNA 兩條鏈上標明 5' 至 3' 方向,並用對比鮮明的顏色突出 PAM 三核苷酸序列。
  • 切割位點標記:相對於 PAM,在 -3 和 -4 位點之間用清晰的垂直剪刀符號或虛線標示預計切割位置。
  • 方法部分披露:可在稿件中說明:‘CRISPR-Cas9 機製圖和靶向示意圖使用 SciDraw AI(SciDraw,https://scidraw.org)生成,並根據目標位點測序數據進行了核對。’ 請按期刊政策調整披露方式。
  • 可重復性核對:確保圖中所有 sgRNA 間隔序列與補充方法表中列出的寡核苷酸序列一致。
雙核酸酶切割圖,展示 HNH 和 RuvC 結構域造成 DNA 雙鏈斷裂

4. 面向期刊投稿與學術報告的多格式匯出與排版最佳化

同一張路徑或機製圖常需兼顧論文雙欄配圖、16:9 學術會議投影片及基金申請書。合理規劃視覺層級,可確保在不同媒介下均保持清晰可讀:

  • 匯出分層 SVG 向量圖或原生 PPTX 投影片,根據目標期刊或會場螢幕靈活調整字級、箭頭粗細與配色方案。
  • 在多面板組合圖中保持一致的色彩編碼,使上游刺激、活性複合物與抑制劑一目了然。
  • 在正式投稿或報告前,對照原始實驗數據與權威文獻核對所有基因符號、修飾位點與因果箭頭。

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CRISPR-Cas9 圖示常見問題

CRISPR-Cas9 圖示生成器 | SciDraw