Edição genômica direcionada

Gerador de diagramas CRISPR-Cas9 Diagrama CRISPR-Cas9

Crie figuras claras sobre mecanismos de edição genômica com o Gerador de diagramas CRISPR-Cas9. Mostre a abertura do DNA-alvo, o pareamento do espaçador do RNA guia único (sgRNA), a clivagem pelos domínios endonucleases de Cas9 e as vias de reparo de quebras de dupla fita.

Espaçador e arcabouço do sgRNAReconhecimento do PAM 5′-NGGSVG e PPTX editáveisQualidade para publicação

Gerador de diagramas CRISPR-Cas9

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Como funciona

Como gerar diagramas CRISPR-Cas9 em 3 etapas

Prepare figuras de engenharia genômica para revisão, representando lobos da nuclease, pareamento com o alvo e vias posteriores de reparo do DNA.

Defina o RNA guia, o PAM e o locus-alvo

Especifique a variante da Cas (SpCas9, SaCas9, Cas12a), a sequência espaçadora de 20 nt, o motivo PAM (5′-NGG) e o locus genômico-alvo.

Revise a clivagem da nuclease e os mecanismos de reparo

Confira as setas de clivagem HNH e RuvC, as dimensões da bolha R-loop e as vias posteriores de knockout por NHEJ ou knock-in por HDR.

Exporte vetores editáveis para publicação

Baixe gráficos SVG em camadas ou slides PowerPoint PPTX para ajustar fontes de nucleotídeos, cores das proteínas e layout dos painéis.

Exemplos de diagramas CRISPR-Cas9

Explore diagramas científicos editáveis sobre a arquitetura do complexo ribonucleoproteico Cas9, reconhecimento do PAM, clivagem por nuclease e edição de bases.

Complexo RNP Cas9 e arquitetura dos domínios

Endonuclease Cas9 bilobada com o lobo de reconhecimento REC, o lobo catalítico NUC, a hélice-ponte e as interações com o arcabouço do sgRNA.

Cas9 RNP

Reconhecimento do PAM e formação do R-loop

A ligação ao motivo adjacente ao protoespaçador (PAM, 5′-NGG) provoca a abertura local do DNA e o pareamento do espaçador guia de 20 nucleotídeos.

5'-NGG-3' PAM

Clivagem endonuclease por HNH e RuvC

Clivagem coordenada das fitas de DNA-alvo e não alvo a 3 pares de bases a montante do PAM, produzindo uma quebra de dupla fita com extremidades cegas.

HNH

Knockout por NHEJ versus knock-in por HDR

Vias de reparo celular do DNA que comparam indels propensos a erros gerados por NHEJ com knock-in direcionado por molde via HDR.

NHEJ

Sistemas de edição de bases e edição prime

Fusões com nickase modificadas, incluindo editores de bases de citosina/adenina (CBE/ABE) e editores prime com transcriptase reversa (PE2/PE3).

Base Editor

Entrega in vivo e métodos de validação

Comparação de modalidades de entrega por vetores AAV e nanopartículas lipídicas, com validação de efeitos fora do alvo por NGS e GUIDE-seq.

AAV
Por que escolher SciDraw

Por que pesquisadores escolhem SciDraw para diagramas CRISPR

O SciDraw pode ajudar a criar um rascunho visual científico. Antes de usar, confira rótulos, relações e afirmações com a fonte.

Necessidade do fluxo de trabalho
SciDraw AI
IA de imagem genérica
Arquitetura precisa da proteína bilobada
Representa os lobos de reconhecimento REC e catalítico NUC, além da hélice-ponte, com base em estruturas publicadas de crio-EM.
Gera formas amorfas em vez de lóbulos REC/NUC distintos e grampos de sgRNA.
Coordenadas precisas do PAM e da clivagem
Mantém a polaridade 5′-3′ das fitas de DNA e posiciona os marcadores de clivagem a 3 pb a montante do motivo 5′-NGG.
Posiciona locais de corte aleatoriamente sem alinhamento PAM 5'-NGG-3' ou alça R.
Exportação vetorial e para PowerPoint
Baixe SVGs escaláveis ou slides PPTX editáveis para modificar letras de nucleotídeos, cores e espessuras de linha.
Produz imagens estáticas em pixels onde as sequências de nucleotídeos não podem ser corrigidas.
Condições de uso acadêmico e comercial
O uso comercial depende do plano, da Licença SciDraw, da legislação aplicável e dos direitos de terceiros. Confira também as exigências de divulgação do periódico.
Termos de licença ambíguos que dificultam declarações em manuscritos.
Guia prático

Guia prático para criar figuras do mecanismo CRISPR-Cas9

Aplique princípios de visualização científica para criar diagramas claros e legíveis; confira também as instruções do periódico de destino.

Complexo ribonucleoproteico Cas9 com lobos REC e NUC e sgRNA

1. Anatomia estrutural da endonuclease Cas9 e do RNA guia

CRISPR-Cas9 (sistema CRISPR do tipo II de Streptococcus pyogenes) funciona por meio de uma maquinaria coordenada de ribonucleoproteínas (RNP). Ao ilustrar esse sistema para publicação, represente cada componente estrutural com clareza:

  • Organização bilobada: o polipeptídeo Cas9 forma dois lobos principais separados por uma hélice-ponte carregada positivamente: o lobo de reconhecimento alfa-helicoidal (REC) e o lobo nucleásico (NUC).
  • Domínios catalíticos de NUC: o lobo NUC contém dois centros endonucleásicos: HNH, que cliva a fita-alvo complementar, e RuvC, que cliva a fita deslocada não complementar.
  • Estrutura do RNA guia único (sgRNA): o sgRNA modificado consiste em um espaçador de 20 nucleotídeos específico para o alvo, ligado a um arcabouço de crRNA transativador (tracrRNA) com mais de 80 nucleotídeos e três alças-tronco.
  • Reconhecimento do PAM: o domínio de interação com PAM (PID) C-terminal se liga ao motivo adjacente ao protoespaçador 5′-NGG-3′ na fita não alvo, iniciando a abertura local da dupla hélice.
Clivagem pelas nucleases HNH e RuvC que produz uma quebra de dupla fita

2. Visualização do reparo de quebras de dupla fita: NHEJ versus HDR

Um esquema completo do mecanismo CRISPR geralmente mostra o destino celular do locus-alvo após quebras de dupla fita (DSBs) induzidas por Cas9:

  • Junção de extremidades não homólogas (NHEJ): predominante em células não divisórias e somáticas de mamíferos. Ku70/Ku80 e DNA-PKcs ligam diretamente as extremidades cegas e podem introduzir pequenas inserções ou deleções (indels), causando mudanças no quadro de leitura e knockout gênico.
  • Reparo dirigido por homologia (HDR): ocorre predominantemente nas fases S e G2 do ciclo celular. Rad51 promove a invasão da fita usando um molde doador exógeno (ssODN ou plasmídeo de fita dupla) para substituir sequências ou inserir etiquetas com precisão.
  • Tecnologias alternativas: diferencie a clivagem DSB convencional da edição de bases por nickase (desaminação CBE/ABE) e da edição prime (síntese por transcriptase reversa a partir de pegRNA), que contornam deliberadamente quebras de dupla fita para reduzir a formação de indels.
Entrega de CRISPR in vivo por AAV e nanopartículas lipídicas, com validação por NGS

3. Boas práticas para apresentar figuras CRISPR em artigos revisados por pares

Periódicos acadêmicos exigem anotações precisas das sequências genômicas-alvo, controles de efeitos fora do alvo e declarações sobre ferramentas de software:

  • Anotação de sequência: inclua marcadores explícitos de orientação 5′-3′ nas duas fitas de DNA e destaque o trinucleotídeo PAM exato com uma cor contrastante.
  • Indicação do sítio de clivagem: marque o plano de clivagem previsto entre as posições -3 e -4 em relação ao PAM com tesouras verticais ou linhas tracejadas claras.
  • Atribuição nos métodos: você pode informar no manuscrito: “As figuras do mecanismo CRISPR-Cas9 e os esquemas de direcionamento foram elaborados com o auxílio do SciDraw AI (SciDraw, https://scidraw.org) e conferidos com os dados de sequenciamento do locus-alvo.” Ajuste o texto à política do periódico.
  • Verificação de reprodutibilidade: confira se todas as sequências espaçadoras de sgRNA na figura correspondem aos oligonucleotídeos listados nas tabelas de métodos suplementares.
Comparação das vias de reparo NHEJ e HDR: knockout por indels e knock-in por molde

4. Exportação, layout e adaptação para periódicos e apresentações

Uma única figura de via ou mecanismo frequentemente atende a múltiplos formatos — de um painel de manuscrito a um slide widescreen 16:9 ou projeto de fomento. Planeje a hierarquia visual para manter a legibilidade:

  • Exporte arquivos SVG em camadas ou slides PPTX nativos para ajustar tamanhos de fonte, espessura de setas e paletas de cores.
  • Mantenha uma codificação de cores consistente entre os painéis para identificar estímulos, complexos ativos e inibidores rapidamente.
  • Confira todos os símbolos gênicos, sítios de fosforilação e conectores causais com seus dados experimentais antes da submissão.

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Depoimentos

Por que os pesquisadores mantêm SciDraw em seu fluxo de trabalho

Pesquisadores, estudantes de pós-graduação e educadores compartilham como o SciDraw os ajuda a criar figuras científicas, diagramas científicos, resumos gráficos e recursos visuais de ensino mais claros com mais rapidez.

Para uma palestra sobre células vegetais, eu precisava que os cloroplastos e o vacúolo fossem evocados sem reconstruir uma lâmina antiga. SciDraw me deu um layout de figura científica útil que entrou em minha apresentação de slides depois de apenas algumas edições de rótulo.

Dra.

Dra.

Professor de Biologia Celular

Quando um aluno pede um exemplo de diagrama de força além do livro didático, abro SciDraw em vez de redesenhar um em um slide. É o gerador de diagrama científico que procuro primeiro, depois verifico rapidamente cada vetor.

Dr. Javier Ortega

Dr. Javier Ortega

Instrutor de Física

Para propostas de financiamento, usamos SciDraw para chegar a um acordo sobre o diagrama de configuração experimental antes que alguém comece a polir a figura científica. Isso reduziu as idas e vindas e deu à equipe um visual compartilhado desde o primeiro dia.

Dr. Devendra Verma

Dr. Devendra Verma

Diretor do Laboratório de Pesquisa

Posso comparar alguns diagramas de caminhos biológicos para notas de estudo antes de decidir por um.

Minh Nguyen

Minh Nguyen

Estudante de pós-graduação em ciências

Para minha dissertação, inicio o processo de transformação do manuscrito em figura com caminhos neurais e layouts de sinapses em SciDraw. Isso me dá uma primeira composição forte, para que eu possa dedicar o tempo do Illustrator aos detalhes que importam.

Dra. Ananya Rao

Dra. Ananya Rao

Doutorando · Neurociências

O primeiro desenho científico fez com que nossa revisão do projeto de destilação fracionada avançasse imediatamente.

Dr.Marcus Davis

Dr.Marcus Davis

Líder de Engenharia Química

Se a imagem stock não corresponder ao tema climático daquela semana, faço um diagrama rápido em SciDraw. Isso dá à turma um visual adequado à discussão e posso adaptar os rótulos ao nível deles.

Profa. Mei-Ling Zhao

Profa. Mei-Ling Zhao

Educador de Ciências Ambientais

Perguntas frequentes

Perguntas frequentes sobre diagramas CRISPR-Cas9

Gerador de diagramas CRISPR-Cas9 | SciDraw