Editing mirato del genoma

Generatore di diagrammi CRISPR-Cas9 Diagramma CRISPR-Cas9

Crea figure chiare sui meccanismi di editing del genoma. Rappresenta l’apertura del DNA bersaglio, l’ibridazione dello spacer dell’RNA guida (sgRNA), il clivaggio da parte dei domini nucleasici di Cas9 e le vie di riparazione delle rotture a doppio filamento.

Spacer e struttura dell’sgRNARiconoscimento del PAM 5′-NGGSVG e PPTX modificabiliPer figure scientifiche

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Come funziona

Crea un diagramma CRISPR-Cas9 in 3 passaggi

Prepara figure di ingegneria genomica da verificare, con domini nucleasici, ibridazione del bersaglio e vie di riparazione del DNA.

Definisci RNA guida, PAM e locus bersaglio

Specifica la variante dell’enzima Cas (SpCas9, SaCas9, Cas12a), la sequenza spacer di 20 nucleotidi, il motivo PAM (5′-NGG) e il locus genomico bersaglio.

Verifica clivaggio nucleasico e meccanismi di riparazione

Controlla le frecce di clivaggio HNH e RuvC, le dimensioni dell’R-loop e i rami di riparazione NHEJ (knockout) o HDR (knock-in).

Esporta vettori modificabili

Scarica grafica SVG a livelli o diapositive PowerPoint (PPTX) modificabili per regolare font dei nucleotidi, colori delle proteine e layout dei pannelli.

Esempi di diagrammi CRISPR-Cas9

Esplora diagrammi scientifici modificabili che illustrano l’architettura del complesso ribonucleoproteico Cas9, il riconoscimento del PAM, il clivaggio nucleasico e l’editing di basi.

Complesso RNP Cas9 e architettura dei domini

Endonucleasi Cas9 a due lobi con lobo di riconoscimento REC, lobo catalitico NUC, elica ponte e interazioni con la struttura dell’sgRNA.

Cas9 RNP

Riconoscimento del PAM e formazione dell’R-loop

Il legame al motivo adiacente al protospacer (5′-NGG) innesca l’apertura locale del DNA e l’ibridazione dello spacer guida di 20 nucleotidi.

5'-NGG-3' PAM

Clivaggio delle endonucleasi HNH e RuvC

Clivaggio coordinato dei filamenti di DNA bersaglio e non bersaglio tre paia di basi a monte del PAM, che può produrre una rottura a doppio filamento con estremità piatte.

HNH

Knockout NHEJ o knock-in HDR

Rami della riparazione cellulare che confrontano gli indel potenzialmente introdotti dalla NHEJ con l’inserimento guidato da matrice tramite HDR.

NHEJ

Sistemi di base editing e prime editing

Fusioni di nickasi per il base editing (CBE/ABE) e prime editor con trascrittasi inversa (PE2/PE3).

Base Editor

Somministrazione in vivo e metodi di validazione

Confronto delle modalità di somministrazione con vettori AAV e nanoparticelle lipidiche e validazione degli off-target tramite NGS o GUIDE-seq.

AAV
Perché SciDraw

Perché usare SciDraw per i diagrammi CRISPR

SciDraw può aiutare a preparare un’immagine scientifica. Prima dell’uso, verifica etichette, relazioni e affermazioni con la fonte.

Esigenza del flusso di lavoro
SciDraw AI
IA d’immagini generica
Architettura proteica a due lobi
Rappresenta i lobi di riconoscimento REC e catalitico NUC e l’elica ponte. Verifica la rappresentazione rispetto alla struttura di riferimento pertinente.
Genera forme imprecise invece dei lobi REC/NUC distinti e delle forcine di sgRNA.
Riferimenti del PAM e del clivaggio
Indica la polarità 5′–3′ dei filamenti di DNA e la posizione prevista del clivaggio rispetto al motivo 5′-NGG, secondo la nucleasi utilizzata.
Posiziona i siti di taglio in modo casuale senza allineamento PAM 5'-NGG-3' né R-loop.
Esportazione vettoriale e PowerPoint
Scarica SVG ridimensionabili o diapositive PPTX modificabili per regolare nucleotidi, colori e spessori delle linee.
Produce immagini statiche in pixel in cui le sequenze nucleotidiche non sono modificabili.
Uso e licenza
L’uso commerciale dipende dal piano, dalla licenza SciDraw, dalla legge applicabile e dai diritti di terzi. Prima della pubblicazione, controlla anche le istruzioni della rivista.
Termini di licenza ambigui che complicano le dichiarazioni editoriali.
Guida pratica

Guida pratica alla progettazione di figure sui meccanismi CRISPR-Cas9

Applica principi di visualizzazione scientifica per rendere i diagrammi chiari e verificabili. Consulta le istruzioni della rivista scelta.

Diagramma del complesso ribonucleoproteico Cas9 con lobi REC e NUC e sgRNA

1. Anatomia strutturale dell’endonucleasi Cas9 e dell’RNA guida

CRISPR-Cas9, sistema CRISPR di tipo II di Streptococcus pyogenes, agisce tramite un complesso ribonucleoproteico (RNP). Nelle figure scientifiche, rappresenta le principali componenti strutturali:

  • Organizzazione a due lobi: il polipeptide Cas9 si ripiega in due lobi principali separati da un’elica ponte carica positivamente: il lobo di riconoscimento elicoidale REC e il lobo nucleasico NUC.
  • Domini catalitici NUC: il lobo NUC contiene due centri nucleasici distinti: HNH, che cliva il filamento di DNA bersaglio complementare, e RuvC, che cliva il filamento spostato non complementare.
  • Struttura dell’RNA guida singolo (sgRNA): lo sgRNA ingegnerizzato comprende uno spacer di 20 nucleotidi specifico per il bersaglio, collegato a un’impalcatura tracrRNA di oltre 80 nucleotidi con tre forcine.
  • Riconoscimento del PAM: il dominio C-terminale d’interazione con PAM (PID) si lega al motivo adiacente al protospacer 5′-NGG-3′ sul filamento non bersaglio, avviando l’apertura locale della doppia elica.
Diagramma del doppio clivaggio dei domini nucleasici HNH e RuvC che produce una rottura a doppio filamento

2. Rappresentare la riparazione delle rotture a doppio filamento: NHEJ e HDR

Uno schema completo del meccanismo CRISPR può mostrare il destino del locus bersaglio dopo una rottura a doppio filamento (DSB) indotta da Cas9:

  • Giunzione delle estremità non omologhe (NHEJ): comune in diversi contesti cellulari, comprese cellule somatiche di mammifero. Ku70/Ku80 e DNA-PKcs partecipano alla ligazione delle estremità e possono introdurre piccole inserzioni o delezioni (indel), che possono spostare la cornice di lettura e inattivare il gene.
  • Riparazione diretta dall’omologia (HDR): attiva soprattutto nelle fasi S e G2. Rad51 contribuisce all’invasione del filamento utilizzando una matrice donatrice esogena (ssODN o plasmide a doppio filamento) per la sostituzione precisa di una sequenza o l’inserimento di un tag.
  • Tecnologie alternative: distingui il clivaggio DSB convenzionale dal base editing mediato da nickasi (deaminazioni CBE/ABE) e dal prime editing (sintesi tramite trascrittasi inversa da pegRNA), che mirano a evitare la rottura a doppio filamento.
Diagramma di riconoscimento del PAM e apertura del DNA con sito 5′-NGG e formazione dell’R-loop

3. Buone pratiche per riportare figure CRISPR nei manoscritti

Per una figura scientifica, annota sequenze genomiche bersaglio e controlli off-target e dichiara l’uso degli strumenti secondo le istruzioni della rivista:

  • Annotazione della sequenza: indica chiaramente l’orientamento 5′–3′ di entrambi i filamenti di DNA ed evidenzia il tripletto PAM.
  • Indicazione del sito di clivaggio: segna il sito previsto tra le posizioni −3 e −4 rispetto al PAM con forbici o linee tratteggiate ben visibili.
  • Dichiarazione nei Metodi: se richiesto dalla rivista, indica che gli schemi del meccanismo CRISPR-Cas9 sono stati preparati con SciDraw AI e verificati sulla base dei dati di sequenziamento del locus bersaglio. (SciDraw)
  • Verifica della riproducibilità: assicurati che le sequenze spacer dell’sgRNA nella figura corrispondano agli oligonucleotidi descritti nei metodi supplementari.
Diagramma delle vie di riparazione NHEJ e HDR con confronto tra knockout da indel e inserimento da matrice

4. Esportazione, layout e adattamento per riviste e presentazioni

Una singola figura di via o meccanismo viene spesso utilizzata sia in un manoscritto sia in una diapositiva 16:9 per congressi o bandi di ricerca. Pianifica la gerarchia visiva affinché etichette e compartimenti restino leggibili:

  • Esporta file SVG a livelli o diapositive PPTX native per regolare dimensioni dei caratteri, spessore delle frecce e tavolozza dei colori.
  • Mantieni una codifica cromatica coerente tra i pannelli per distinguere subito stimoli a monte, complessi attivi e inibitori.
  • Verifica tutti i simboli genici, i siti di fosforilazione e i connettori causali rispetto ai dati sperimentali prima dell’invio.

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Testimonianze

Cosa dicono i ricercatori su SciDraw

Scopri come docenti universitari, dottorandi e team di ricerca utilizzano SciDraw per creare figure scientifiche per pubblicazioni e congressi.

Avevo bisogno di un rapido diagramma del sistema portale epatico per una conferenza in sede. Ho descritto ciò che volevo e ho ottenuto un'illustrazione chirurgica etichettata in meno di un minuto. Il nostro dipartimento di arte medica impiegava due settimane per la stessa cosa. con SciDraw.

Sarah Mitchell

Sarah Mitchell

Chirurgo Generale

I miei studenti hanno difficoltà con le relazioni spaziali nel plesso brachiale. Genero diagrammi anatomici ad angoli multipli durante la lezione e li lascio confrontare. Questo tipo di insegnamento visivo in tempo reale era impossibile prima degli strumenti di illustrazione basati sull’intelligenza artificiale. con SciDraw.

Marco Reyes

Marco Reyes

Professore di anatomia

Spiegare i difetti cardiaci congeniti ai genitori è difficile. Creo diagrammi educativi per i pazienti che mostrano la condizione specifica del loro bambino con chiare visualizzazioni prima e dopo la riparazione chirurgica. I crediti gratuiti mi permettono di testarlo prima di impegnarmi. con SciDraw.

Amara Patel

Amara Patel

Cardiologo Pediatrico

Gli esami di anatomia richiedono di identificare le strutture da ogni angolazione. Lo uso per generare diagrammi anatomici etichettati per lo studio: il plesso brachiale, le valvole cardiache, i nervi cranici. Molto più veloce che ridisegnare dall'atlante di Netter.

Alex Nguyen

Alex Nguyen

Studente di Medicina del 4° anno

La mia tesi ha più di 40 figure. Assumere un illustratore medico costerebbe migliaia. Descrivo ogni percorso neurale e ottengo dati scientifici di qualità da pubblicazione che il mio comitato ha effettivamente complimentato. Mi ha fatto risparmiare oltre $ 5.000. con SciDraw.

Priya Sharma

Priya Sharma

Dottorando · Neuroscienze

Lo uso per creare diagrammi di posizionamento del catetere per le procedure IR. Mostrare ai residenti esattamente dove dovrebbe trovarsi il filo guida rispetto all'arteria renale fa risparmiare tempo nella sala angiografica. La precisione anatomica è impressionante per uno strumento di intelligenza artificiale.

Marco Davis

Marco Davis

Radiologo interventista

I pazienti comprendono meglio i risultati della loro biopsia quando mostro loro un diagramma dello strato cutaneo con contrassegnata la posizione della lesione. Genero queste illustrazioni dermatologiche durante le consultazioni: ci vogliono circa 30 secondi. con SciDraw.

Mei-Ling Chen

Mei-Ling Chen

Dermatologo

FAQ

Domande frequenti sui diagrammi CRISPR-Cas9

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